Активность плаценты при гестозах

p align="left">Также, в III триместре выявлено снижение содержания ксантина, гипоксантина и мочевой кислоты на 33%, 18,2% и 28,4% (p<0,05), соответственно, достоверное снижение активности аргиназы на 26,9% (p<0,05) и содержания спермидина и агматина на 46% и 51% (p<0,05), соответственно, возрастание активности СОД в 10,5 раз (p<0,01), глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы на 52,7% и 117,6% (p<0,01), соответственно (табл. 2, 3). (ШЕСТОПАЛОВ АЛЕКСАНДР ВЯЧЕСЛАВОВИЧ МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ПЛАЦЕНТАРНЫХ МАКРОФАГОВ И МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ФОРМИРОВАНИЯ ПЛАЦЕНТЫ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТАХ ТЕЧЕНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук)

1. Активность СОД в сыворотке крови во II-III триместрах неосложненной беременности выше 5,1 Ед/мл позволяет прогнозировать развитие гестоза в 68,2% случаев [Бандик В. П., Чернокульский С.Т, Яроцкий М. Е., Венцковский Б. М. Ультраструктурные особенности микрососудистого русла терминальных ворсин хориона и плацентарный барьер при поздних токсикозах беременности // ПАГ.-- 1994.-- № 2.-- С. 60-61.].

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы исследования

Активность ферментов определяли в плацентарной ткани, полученной сразу после родов при соблюдении холодового режима. Ткани взвешивали, навески гомогенизировали в стеклянном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком. Для определения активности КПН, ФМСФ-КП при гомогенизировании использовали 10 мМ натрий-ацетатный буфер (рН 5,6), содержащий 50 мМ NaCl, в соотношении 1:50 (вес:объем), каталазы - , в соотношении 1:5, церулоплазмина - , в соотношении 1:5. В работе использовали реактивы: ацетат натрия («MERCK», Германия), ФМСФ («Serva», США), ГЭМЯК (любезно предоставлена доктором О.Л. Варламовым), субстраты - дансил-фен-ала-арг, дансил-фен-лей-арг, синтезированные к.х.н. В.Н. Калихевичем. Все остальные реактивы были отечественного производства с квалификацией «ХЧ» и «ОСЧ».

2.1.1. Клинические группы

Было обследовано 19 образцов плацентарной ткани женщин в возрасте от 20 до 35 лет. Родильницы были разделены на 2 клинические группы. В І группу (контрольную) вошли женщины с физиологическим течением беременности и родов. У всех женщин беременность закончилась срочными родами (срок родов колебался от 38 до 40 недель). Околоплодные воды были светлые. Все дети родились в удовлетворительном состоянии со средней оценкой по шкале Апгар на 1-й минуте - 8,2, на 5-й минуте жизни - 8,6. При гистологическом исследовании последов отмечены умеренно-выраженные компенсаторно-приспособительные процессы.

?? группу составили пациентки с ОПГ-гестозом легкой степени тяжести. У всех женщин беременность закончилась срочными родами (срок родов колебался от 38 до 40 недель). Околоплодные воды были светлые. Средняя оценка новорожденных по шкале Апгар на 1-й минуте составила - 8,2, на 5-й минуте жизни - 8,4.

Диагноз поставлен на основании клинических проявлений, клинико-лабораторных данных; оценку степени тяжести гестоза проводили по унифицированной шкале Гоека-Савельевой. При гистологическом исследовании последов в данной группе обнаружены умеренно-выраженные компенсаторно-приспособительные процессы, в некоторых случаях отмечены очаговые нарушения микроциркуляции, инволютивно-дистрофические изменения, признаки инфекции.

2.2. Методы исследования

2.2.1. Метод определения активности основных карбоксипептидаз

Активность КПН определяли флюорометрическим методом Fricker и Snyder [153].

Для определения активности КПН 50 мкл гомогената ткани добавляли к 150 мкл (в случае опытной пробы) 50 мМ натрий-ацетатного буфера, рН 5,6, содержащего 50 мМ NaCl, или к смеси 140 мкл вышеуказанного буфера и 10 мкл 25 мкМ водного раствора ингибитора ГЭМЯК (в случае контрольной пробы). Далее пробы преинкубировали 8 минут при 37?С. Реакцию начинали прибавлением 50 мкл предварительно нагретого до 37?С 210 мкМ раствора дансил-фен-ала-арг, приготовленного на воде (конечная концентрация в реакционной смеси 42 мкМ). Пробы инкубировали 60 минут при 37?С. Реакцию останавливали прибавлением 50 мкл 1М раствора HCl.

Для экстракции продукта реакции дансил-фен-ала к пробам приливали по 1,5 мл хлороформа, интенсивно встряхивали в течение 60 с. Хлороформную и водную фазы разделяли центрифугированием в течение 10 минут при 1000 об/мин.

Измерение флюоресценции хлороформной фазы проводили на флюориметре ФМЦ-2 при ?ex=360 нм и ?em=530 нм в кювете толщиной 1 см. В качестве стандарта использовали 1 мкМ раствор дансил-фен-ала в хлороформе.

Активность фермента определяли как разность прироста флюоресценции в пробах, не содержащих и содержащих ГЭМЯК, и выражали в нмоль дансил-фен-ала, образовавшегося за 1 минуту инкубации в пересчете на 1 мг белка.

Для определения активности ФМСФ-ингибируемой КП 50 мкл гомогената ткани добавляли к 150 мкл (в случае опытной пробы) 50 мМ натрий-ацетатного буфера, рН 5,6, содержащего 50 мМ NaCl, или к смеси 140 мкл вышеуказанного буфера и 10 мкл 25 мМ ингибитора ФМСФ, приготовленного на этаноле, который добавляли после смешивания гомогената ткани с буфером (в случае контрольной пробы). Пробы преинкубировали 8 мин при 37?С, затем вносили 50 мкл предварительно нагретого до 37?С 210 мкМ раствора дансил-фен-лей-арг, приготовленного на воде. Далее пробы обрабатывали как описано для КПH. Активность фермента определяли как разницу в приросте флюоресценции в пробах, не содержащих и содержащих ФМСФ и выражали в нмоль дансил-фен-лей, образовавшегося за 1 мин инкубации в пересчете на 1 мг белка.

Концентрацию белка оп-ределяли методом Лоури [80].

2.2.2 Метод определения каталазы

В две колбы наливали по 7 мл дистиллированной воды и добавляли в них по 1 мл гомогената. Содержимое кипятили 2 - 3 мин. В обе вносили по 2 мл 1% H2O2 и оставляли на 30 мин при комнатной температуре. Затем приливали по 5 мл 10% H2SO4 и оттитровывали содержимое 0,05н KMnO4 до розового цвета.

Расчет: 1мл 0,05 н KMnO4 -- 0,85 г H2O2. Таким образом, разницу в результатах титрования контроля и опыта умножаем на эту величину, получали количество мг перекиси.

2.2.3 Метод определения активности церулоплазмина

Активность церулоплазмина определяли модифицированным методом Ревина, который базируется на окислении p-фенилендиамина при участии этого фермента. Ферментативную реакцию останавливают добавлением фтористого натрия. По оптической плотности образующихся продуктов судят о концентрации церулоплазмина.

В обычные химические пробирки вносили по 0,1 мл гомогената. В одну из пробирок, служащую контрольной, добавляли 2 мл раствора фтористого натрия (с целью инактивации ферментативной активности церулоплазмина). Затем во все пробирки помещали по 8 мл ацетатного буфера и по 1 мл раствора p-фенилендиамина (используемого в качестве субстрата). Пробирки встряхивали и ставили на 1ч в водяную баню с температурой +37?С. После инкубации во все пробирки, за исключением контрольной, доливали по 2 мл раствора фтористого натрия. Содержимое пробирок перемешивали и переносили в холодильник, где выдерживали в течение 30 мин при +4?С. Пробы колориметрировали на ФЭКе с зеленым светофильтром (530нм) в кюветах с шириной слоя 10 мм. Результаты сравнивали с данными контрольной пробы (бледно-розовая окраска). Умножали значения оптической плотности на коэффициент пересчета 875, получали величину концентрации церулоплазмина в мг/л.

2.2.4. Метод определения уровня продуктов перекисного окисления липидов (диеновых и триеновых конъюгатов)

Для экстракции липидов брали 1 мл 25% гомогената плацентарной ткани, приливали 3 мл метанола, перемешивали стеклянной палочкой, встряхивали в течение 15 мин, затем центрифугировали при 3000 об/мин в течение 5 мин. Добавляли 3 мл гексана, вновь тщательно перемешивали стеклянной палочкой, встряхивали в течение 15 мин и оставляли отстаиваться на 30 мин. После разделения слоев, верхний (метанол-гексановый слой) отбирали в сухую пробирку и использовали для исследований.

Уровень диеновых конъюгатов определяли спектрофотометрически при длине волны 233 нм, кетодиенов и сопряженных триенов - при длине волны 278 нм, ненасыщенных липидов - при длине волны 220 нм. Рассчитывали содержание диеновых конъюгатов, кетодиенов и сопряженных триенов по отношению к уровню ненасыщенных липидов (E233/E220 и E278/E220).

2.2.5 Метод определения уровня гидроперекисей

Для приготовления гомогената использовали буфер 0,025 М трис HCl (pH 7,4), содержащий 0,175 М хлорида калия. Гомогенат (25%) по 2 мл помещают в центрифужные пробирки и осаждают белок добавлением 0,2 мл 50%-ного раствора ТХУ.

Образующийся осадок отделяют центрифугированием в течение 10 мин. при 4000g. 2 лм надосадочной жидкости доводят 96% этанолом до 27 мл. К равным объемам до 27 мл добавляют 0,2 мл концентрированной соляной кислоты и 0,025 мл 5%-ного раствора соли Мора в 3%-ной соляной кислоте, пробы интенсивно встряхивают. Точно через 30с приливают 1мл 20%-ного раствора роданистого калия, после чего развивается малиновая окраска. В качестве контроля используют пробы, содержащие 96%-ный этанол вместо НЖ. Изменение оптической плотности проводят в течение 10 мин. после добавления роданистого калия при 480 нм.

2.2.6 Статистическая обработка результатов исследования

Достоверность отличий между средними определяли с использованием t-критерия Стьюдента. Корреляционный анализ проводили с помощью программы Statgraphics (версия 3.0) (“STSC, Inc.” США) в режимах Simple Correlation.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Активность КПН и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в плацентарной ткани в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести

Результаты исследования показали достоверное снижение активности КПH и ФМСФ-КП в плацентарной ткани при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести в 2 раза по сравнению с нормой (рисунок 1, 2).

Рисунок 1. Активность карбоксипептидазы H в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести (нмоль продукта, образовавшегося за 1мин инкубации на 1мг белка; M±m; *** - p<0,001 относительно нормы)

По данным корреляционного анализа выявлена положительная взаимосвязь между активностью КПН и ФМСФ-КП в плацентарной ткани. Уменьшение активности КПH согласуется с данными литературы о снижении концентрации белковых гормонов в фетоплацентарном комплексе (ФПК) при ОПГ-гестозах [7,8,9,11,12,13]. Наиболее важными из них являются хорионический гонадотропин, плацентарный лактоген, пролактин, инсулин, инсулиноподобные факторы роста, C - пептид и др.

Рисунок 2. Активность ФМСФ-КП в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести (нмоль продукта, образовавшегося за 1мин инкубации на 1мг белка; M±m; *** - p<0,001 относительно нормы)

По данным корреляционного анализа выявлена положительная взаимосвязь между активностью КПН и ФМСФ-КП в плацентарной ткани. Учитывая, что КПH ассоциирована с процессингом пептидных гормонов [5,16], можно предположить участие фермента в образовании выше указанных биологически активных веществ.

Гестоз является стрессом для ФПК. В условиях патологии отмечено повышение уровней кортикотропин-рилизинг-фактор (КТРФ) и опиоидов в плацентарной ткани [5,8,9,10]. КТРФ, в свою очередь, снижает уровень хорионического гонадотропина, что ведет к угнетению синтеза прогестерона и эстрогенов, которые обладают антиоксидантной активностью. Это усугубляет негативное действие ПО липидов и белков на клеточные мембраны, что может приводить к снижению активности КПH и ФМСФ-КП.

Обнаруженная положительная корреляция между активностью КПН и ФМСФ-КП (r (коэффициент корреляции)=0,9255***) позволяет предположить участие ФМСФ-КП в процессинге регуляторных пептидов в плацентарной ткани.

Таким образом, КПH и ФМСФ-КП плаценты играют важную роль в патогенезе ОПГ-гестоза. Возможно, полученные результаты могут быть основой для дальнейшего исследования гомеостаза ФПК и изыскания способов коррекции метаболических изменений в плаценте при патологическом течении беременности.

3.2 Исследование активности антиоксидантной системы и показателей перекисного окисления липидов в плацентарной ткани в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести

Результаты исследования показали достоверное снижение активности каталазы и церулоплазмина в плацентарной ткани при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести в 1,2 раза по сравнению с нормой (рисунок 3).

Рисунок 3. Активность каталазы в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести в плацентарной ткани (** - p<0,01 относительно нормы).

Рисунок 4. Активность церулоплазмина в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести в плацентарной ткани (* - p<0,05 относительно нормы).

Снижение активности этих ферментов можно объяснить начавшимся угнетением антиоксидантной системы фетоплацентарного комплекса в условиях осложненной беременности.

По данным корреляционного анализа обнаружена положительная взаимосвязь активности церулоплазмина с активностью КПH в плацентарной ткани (r=0,4749*).

Результаты исследования показали достоверное повышение уровня гидроперекисей липидов, а также достоверное снижение концентрации диеновых и триеновых коньюгатов в плацентарной ткани при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести.

Рисунок 5. Концентрация гидроперекисей в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести в плацентарной ткани (*-p<0,05 относительно нормы).

Рисунок 6. Активность диеновых коньюгатов в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести в плацентарной ткани (*-p<0,05 относительно нормы).

Рисунок 7. Активность триеновых коньюгатов в норме и при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести в плацентарной ткани (*-p<0,01 относительно нормы).

По данным корреляционного анализа обнаружены взаимосвязи уровня триеновых коньюгатов с активностью КПН (r=0,6**) и ФМСФ-КП (r=0,5778 **). В патогенезе ОПГ-гестозов ведущую роль играет нарушение структурно-функциональных свойств клеточных мембран плаценты. В условиях патологии усиливается перекисное окисление липидов (ПОЛ) и белков на фоне снижения активности антиоксидантной системы, что является причиной повреждения мембран [6,7,8,9,10,11,12,13].

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ОПГ - гестоз (отек, протеинурия, гипертензия) - это осложнение беременности, обусловленное несоответствием возможностей адаптивных систем организма матери и потребностей развивающегося плода.

Несмотря на многочисленные исследования, проблема гестозов (преэклампсия, гипертония, индуцированная беременностью) остается актуальной. Частота их составляет 8-16%. Они занимают 2-3 место в структуре материнской смертности, являясь одновременно основной причиной неблагоприятных перинатальных исходов. При этом материнская смертность достигает 3,5%, а перинатальная -- 79% [2,6,7].

До настоящего времени причина гестозов достоверно не установлена. Среди причин поздних гестозов, особенно тяжелых форм, ведущее место принадлежит экстрагенитальной патологии, аутоиммунным нарушениям, эндокринным заболеваниям, психологической дезадаптации женщины и другим. Высокая частота гестоза, тяжесть его клинических проявлений, большая вероятность неблагоприятного исхода беременности при этом осложнении для матери и плода обусловливают повышенный интерес к исследованию патогенетических механизмов данной патологии.

ОПГ-гестозы вызывают нарушения компенсаторно-приспособительных механизмов ФПК на молекулярном, клеточном, тканевом, органном, организменном уровнях [67радз], что реализуется в компенсированной, субкомпенсированной и декомпенсированной формах плацентарной недостаточности (ПН). При этом наблюдается комплекс нарушений транспортной, трофической, эндокринной и метаболической функции плаценты, лежащих в основе патологии плода (нередким клиническим проявлением ПН является задержка внутриутробного развития плода, его гипоксия и гипотрофия) и новорожденного (нарушения мозгового кровообращения, кривошея, снижение мышечного тонуса и угнетение физиологических рефлексов).

ОПГ-гестозы оказывают влияние на синтез белковых веществ в плаценте, который обусловлен особенностями функционирования ферментных систем. Поэтому изучение активности пептидгидролаз в норме и при патологии представляет значительный интерес как для понимания биологической роли самих ферментов, так и для понимания роли регуляторных пептидов в этиологии и патогенезе осложнений беременности.

Результаты исследования показали достоверное снижение активности КПH при ОПГ-гестозе по сравнению с нормой. Уменьшение активности КПН согласуется с данными литературы о снижении концентрации белковых гормонов в фетоплацентарном комплексе []. Наиболее важными из них являются хорионический гонадотропин, плацентарный лактоген, пролактин, а также инсулин, С-пептид и др []. Учитывая, что КПН ассоциирована с процессингом пептидных гормонов [], можно предположить участие фермента в образовании выше указанных биологически активных веществ в плаценте.

Результаты исследования показали снижение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в плацентарной ткани при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести по сравнению с нормой. Положительная корреляция активности ФМСФ-КП с КПН позволяет предположить участие фермента в процессинге пептидов.

В связи с тем, что ФМСФ-КП существует в мембраносвязанной форме, снижение активности фермента можно также объяснить изменением состояния мембран под действием продуктов ПОЛ.

Как уже отмечалось ранее, при патологическом течении беременности происходит активация ПОЛ. Результаты исследования показали достоверное снижение активности диеновых и триеновых коньюгатов при ОПГ-гестозе по сравнению с нормой. А также достоверное повышение уровня гидроперекисей.

Этот факт может быть объяснен, что на фоне мы рассматриваем гестоз легкой степени тяжести, в случае которого не произошло еще повышение ПОЛ. Но, в пользу начинающегося обострения говорит повышение уровня гидроперекисей.

Токсичные продукты ПОЛ обезвреживает многокомпонентная АОС. Так как, в литературе мало уделяется внимания анализу биохимических показателей АОС при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести, то целью нашего исследования было определить активность каталазы и церулоплазмина при данной патологии. Результаты исследования показали достоверное снижение активности каталазы и церулоплазмина при ОПГ-гестозе по сравнению с нормой.

Схема 1. Корреляционные взаимосвязи между активностями ферментов

Указания к схеме 1: - положительная корреляция

ГЛАВА5 ВЫВОДЫ

1. Изучена активность пептид-гидролаз лизосомальной и нелизосомальной локализации в плацентарной ткани при физиологическом и патологическом течении беременности. Обнаружено, что при гестационных осложнениях наблюдаются изменения активности КПН, ФМСФ-КП, каталазы, церулоплазмина в плаценте.

2. Выявлено снижение активности КПН в плаценте при всех исследуемых патологиях.

3. Установлено снижение активности ФМСФ-КП в плаценте ОПГ-гестозе легкой степени тяжести по сравнению с нормой.

4. Обнаружено, что активность каталазы и церулоплазмина снижается в плаценте при ОПГ-гестозе легкой степени тяжести по сравнению с нормой.

5. Выявлено повышение активности гидроперекисей в плаценте при ОПГ - гестозе легкой степени тяжести по сравнению с нормой.

ЛИТЕРАТУРА

1. Айламазян Э.К. Антиоксиданты в комплексной терапии позднего токсикоза и связанной с ним хронической гипоксии плода //Акушерство и гинекология.1991,.№3,С.30-34

2. Анастасьева В.Г. Морфофункциональные нарушения фето-плацентарного комплекса при плацентарной недостаточности. - Новосибирск, 1997. - С. 107

3. Аржанова О.Н., Кошелева Н.Г., Ковалева Т.Г., Громыко Г.Л., Тышкевич О.В. Плацентарная недостаточность: диагностика и лечение // Учебное пособие. Под редакцией Э.К. Айламазяна. - СПб: ИЗДАТ НОРМЕД, 2000. - 32 с.

4. Афанасьева Н.В., Стрижаков А.Н. Исходы беременности и родов при фетоплацентарной недостаточности различной степени тяжести.// Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2004, Т. 3, №2, С. 7-13.

5. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. - М.: Издательство «Ньюдиамед», 2001. - 298 с.

6. Беднарский Л.С., Чайка Н.А., Ярославский В.К., Данилова Л.А., Резников Л.Л. Применение эндоваскулярной лазерной терапии в комплексном лечении ОПГ-гестоза // Акушерство и гинекология. - 1995. - № 6. - С. 18-22.

7. Болдырев А.А., Введение в биохимию мембран. -- М.:Наука,1986г.--112с 6.

8. Бурлев В. А. Свободно-радикальное окисление в системе мать--плацента--плод при акушерской патологии // Автореф. дис.... д-ра мед. наук.-- М., 1992.

9. Бычков В.И., Образцова Е.Е., Шамарин С.В. Диагностика и лечение хронической фетоплацентарной недостаточности // Акушерство и гинекология. - 1999. - № 6. - С. 3-6.

10. Васильева З. В., Тягунова А. В., Дpожжева В. В., Конькова Т. А. Функция почек и показатели эндогенной интоксикации пpи гестозах // Акушерство и гинекология. - 2003. - № 1. - С. 16-20.

11. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. Механизмы регуляции активности и биологическая роль карбоксипептидазы H - фермента процессинга нейропептидов // Биохимия. - 1995. - Т. 60, № 12. - С. 1491-1497.

12. Вернигора А.Н., Никишин Н.Н., Генгин М.Т. Частичная характеристика основной фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы из головного мозга кошки // Биохимия. - 1995. - Т. 60, № 11. - С. 1860-1866.

13. Вернигора А.Н., Генгин М.Т., Салдаев Д.А., Щетинина Н.В. Распределение активности фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы в нервной ткани котов // Нейрохимия. - 1997. - Т. 14, № 4. - С. 423 - 425.

14. Вернигора А.Н., Никишин Н.Н., Генгин М.Т. Влияние глюкортикоидов на активность растворимой и мембраносвязанной форм карбоксипептидазы Н in vivo // Укр. биохим. журн. - 1995. - Т. 67, № 6. - С. 93-98.

15. Вернигора А.Н., Щетинина Н.В., Салдаев Д.А., Генгин М.Т. Распределение активности основных карбоксипептидаз в тканях лабораторных животных разных видов // Жур. эволюц. биохим. физиол. - 2002. - Т. 38, № 1. - С. 25-27.

16. Вернигора А.Н., Генгин М.Т. 40 лет изучения ангиотензинпревращающего фермента: проблемы и достижения // Укр. биохим. журн. - 1998. - 70, № 2. - С. 3-14.

17. Ветров В. В. Гомеостаз у беременных с гестозом // Акуш. и гин.-- 1998.-- № 2.-- С. 12-14.

18. Владимиров Ю. А., Арчаков А. И. Перикисное окисление липидов в биологических мембранах.-- М., 1972.

19. Возовик А.В. Коррекция фетоплацентарной недостаточности у беременных с нетоксическим узловым зобом. //Материалы V Российского Форума «Мать и Дитя», Москва,2003, 44-45

20. Габелова К.А., Арутюнян А.В., Зубжицкая Л.Б. Фиксированные иммунные комплексы и NO-синтетазная активность плаценты при гестозе // Вестн. Росс. Ассоц. акуш.-гин. - 2000. - №1. - С. 22-24.

21. Гармашева Н.Л., Константинова Н.Н. Патофизиологические основы охраны внутриутробного развития человека. Л.,1985.,159 с.

22. Грищенко В. И., Щербина Н. А. Совершенствование диагностики и терапии перинатальной патологии // Акушерство и гинекология. 1990, № 10, С. 3-6.

23. Громыко Г.Л., Шпаков А.О. Современные представления о механизмах регуляции кровообращения в плаценте при физиологической и осложненной беременности // Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов. - 1995. - № 4. - С. 35--41.

24. Губский Ю. И., Сильченко И. А., Селезнева А. И. Роль антиоксидантных витаминов в ограничении токсинов. // В кн.: Биофизические и физико-химические исследования в витаминологии.-- М.: Наука, 1981.-- С.104-106.

25. Гутикова Л. В. Клинико-биохимическая оценка эффективности применения липорастворимых антиоксидантов при гестозе // Акушерство и гинекология - 2005. - № 1. - С. 10-13.

26. Демидович Е.О., Игнатко И.В. Особенности плодового почечного кровотока при фетоплацентарной недостаточности. //Материалы V Российского Форума «Мать и Дитя», Москва,2003, С.56-57

27. Дмитриев Л. Ф., Давлетина Л. Н., Иванов И. И. Взаимосвязь окислительного фосфорилирования и перекисного окисления липидов // Биологические мембраны -- 1985.-- Т.2, № 8 -- С. 795-799.

28. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

29. Ломакин М.С., Арцимович Н.Г. Биологически активные вещества, ассоциированные с плацентой // Акушерство и гинекология. - 1991. - № 9. - С. 6-10.

30. Кошелева Н.Г., Аржанова О.Н., Громыко Г.Л. и соавт. Новые подходы к лечению угрожающих преждевременных родов //Вестник Российской ассоциации акушеров гинекологов.1996, №1, С.55-60.

31. Кошелева Н.Г., Никологорская Е.В. Профилактика гипертензивных форм гестоза с помощью магне В6 при невынашивании беременности в анамнезе // Росс. Вестн. Акушера-гинеколога. - 2005. - Т. 5, № 1. - С. 40-42.

32. Кулаков В.И., Мурашко Л.Е., Бурлев В.А. Клинико-биохимические аспекты патогенеза гестозов// Акушерство и гинекология. - 1995. - № 6. - С. 3-5.

33. Кулаков В.И., Бурлев В.А., Коноводова Е.Н., Мурашко Л.Е. и др. Клиническое значение сывороточного железа и ферритина у беременных с железодефицитной анемией и гестозом // Материалы международного симпозиума: "Актуальные вопросы профилактики и лечения гестоза". М. 1998. - С. 66-67.

34.

35. Маркелова Н.Б. Изменения клеточного иммунитета при гестозах беременных и их коррекция // Автореферат дисс. … на соискание ученой степени канд. мед. наук. - Волгоград, 2004.

36. Мерзлякова А.А., Добротина А.Ф., Егорова Н.А. Показатели аутоиммунных антител и состояние системы гемостаза у беременных с рано развившимся гестозом // Нижегородский медицинский журнал. - 2002. - № 4. - С. 16-19.

37. Орджоникидзе Н. В., Клименко П. А., Дживигелова Г. Д. и др. Новое в лечении беременных с синдромом задержки развития плода // Акушерство и гинекология. 1996, № 3, С. 32-36

38. Павлович Л.Л. Патогенетическое обоснование пpименения w-3-полиненасыщенных жиpных кислот пpи осложненном течении беpеменности // Акушерство и гинекология. - 1998. - № 1. - С. 48-52.

39. Паращук Ю. С., Грищенко О. В., Лахно И. В., Шевченко О. И. Фетоплацентарная недостаточность. Учебное пособие. Харьков: ХГМУ, 1999. 45 с.

40. Пестрикова Т. Ю., Чижова Т. В., Петричко М. И. и др. Ведение беременности и родов высокого риска. М.: Сувенир, 1994. 287 с.

41. Подтетенев А.Д., Братчикова Г.В. Тактика ведения родов при гестозе. - М.: РУДН, 2004. - 237 с.

42. Радзинский В.Е., Ордиянц И.М. Плацентарная недостаточность при гестозе // Акушерство и гинекология. - 1999. - № 1. - С.11-16.

43. Радзинский В.Е., Смалько П.Я. Биохимия плацентарной недостаточности. - М: Издательство Российского университета дружбы народов, 2001. - 276 с.

44. Савельева Г.М., Федорова М.В., Клименко П.А., Сичинава Л.Г. Плацентарная недостаточность. - М.: Медицина, 1991. - 272 с.

45. Савельева Г.М., Шалина Р.И., Дживелегова Г.Д., Кашежева А.З., Гандур Д. Принципы профилактики и лечения ОПГ-гестозов // Акушерство и гинекология. - 1992. - № 3-7. - С.14-17.

46. Савельева Г.М., Шалина Р.И. Современные проблемы этиологии, патогенеза, терапии и профилактики гестозов // Акушерство и гинекология. - 1998. - № 5. - С. 6 - 9.

47. Салов И.А., Чеснокова Н.П., Глухова Т.Н. Закономерности развития системных обменных нарушений при гестозе // Росс. Вестн. Акушера-гинеколога. - 2004. - Т. 4, № 3. - С.4-6.

48. Сидельникова В.М. Актуальные проблемы невынашивания беременности. М.,1999, 138 с

49. Трубникова Л. И., Шатохина С. Н., Кузнецова Т. В., Измайлова Ф. А., Таджиева В. Д. Структурные компоненты биологических жидкостей у беременных с гестозом // Акушерство и гинекология. - 2005. - № 2. - С. 35-39.

50. Тютюнник В. Л., Бурлев В. А., Зайдиева З. С. Морфофункциональное состояние системы мать--плацента--плод при плацентарной недостаточности и инфекции // Акушерство и гинекология. - 2003. - № 6. - С. 11-16.

51. Федорова М.В. Плацентарная недостаточность. // Акушерство и гинекология, 1997; 6: 40-3.

52. Федорова М.В., Калашникова Е.П. Плацента и ее роль при беременности. - М.: Медицина, 1986. - 256 с.

53. Хейфец С.Н., Дуда Т.Л., Курасов В.Н. Состояние калликреин-кининовой системы крови при гестозе // Акушерство и гинекология. - 1989. - № 5. - С. 31-33.

54. Шалина Р.И. Мембранные нарушения в патогенезе ОПГ-гестозов // ВРААГ. - 1997. - № 1. - С. 36-43.

55. Шаповаленко С.А. Комплексная диагностика и лечение плацентарной недостаточности у беременных на разных стадиях гестации. // Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов, 2001, № 2, С.43-7

56. Шехтман М. М. Железодефицитная анемия и беременность // Гинекология. - 2000. - № 6. - С. 164-170.

57. Шмагель К. В., Чеpешнев В. А. Плацентаpный лактоген: функции, клиническое значение // Акушерство и гинекология. - 2003. - № 3. - С. 9-12.

58. al-Hameri M., Chlabicz M., Gacko M.
Proteolytic activity of placenta with EPH-gestosis determined by casein and azocasein // Ginekol Pol. - 2001. - Vol. 72, № 6. - P. 478-482.

59. Ahmed I., Glynn B.P., Perkins A.V., Castro M.G., Rowe J., Morrison E., Linton E.A. Processing of Procorticotropin-Releasing Hormone (Pro-CRH): Molecular Forms of CRH in Normal and Preeclamptic Pregnancy // J Clin Endocrinol Metab. - 2000. - Vol. 85, № 2. - P. 755-764.

60. Eipper B.A., Green C.B., Mains R.E. Expression of prohormone processing enzymes in neuroendocrine and non-neuroendocrine cells // Monogr. Natl. Cancer. Inst. - 1992. - № 13. - P. 163-168.

61. Emanuel R.L., Robinson B.G., Seely E.W., Graves S.W., Kohane I., Saltzman D., Barbieri R., Majzoub J.A. Corticotrophin releasing hormone levels in human plasma and amniotic fluid during gestation // Clin Endocrinol (Oxf). - 1994. - Vol. 40, № 2. - P. 257-262.

62. Erdos E.G., Skidgel R.A. The angiotensin-I-converting enzyme // Lab. Invert. - 1987. - V.56. - P.345-348.

63. Evans P., Etherington D.J. Characterisation of cathepsin B and collagenolytic cathepsin from human placenta // Eur J Biochem. - 1978. - Vol. 83, № 1. - P. 87-97.

64. Facchinetti F., Garuti G., Petraglia F., Mercantini F., Genazzani A.R. Changes in beta-endorphin in fetal membranes and placenta in normal and pathological pregnancies // Acta Obstet Gynecol Scand. - 1990. - Vol. 69, № 7-8. - P. 603-607.

65. Fadalti M., Pezzani I., Cobellis L., Springolo F., Petrovec M.M., Ambrosini G., Reis F.M., Petraglia F. Placental corticotropin-releasing factor. An update // Ann N Y Acad Sci. - 2000. - Vol. 900. - P. 89-94.

66. Florio P., Luisi S., Ciarmela P., Severi F.M., Bocchi C., Petraglia F. Inhibins and activins in pregnancy // Mol Cell Endocrinol. - 2004. - Vol. 225, № 1-2. - P. 93-100.

67. Florio P., Imperatore A., Sanseverino F., Torricelli M., Reis F.M., Lowry P.J., Petraglia F. The measurement of maternal plasma corticotropin-releasing factor (CRF) and CRF-binding protein improves the early prediction of preeclampsia // J Clin Endocrinol Metab. - 2004. - Vol. 89, № 9. - P. 4673-4677.

68. Fricker L.D., Plummer T.H., Snyder S.H. Enkephalin convertase: potent, selective and irreversible inhibitors // Biochem. and Biophys. Res. Commun. - 1983. - V. 11, № 3. - P. 994-1000.

69. Hanssens M., Keirse M.J., Spitz B., van Assche F.A. Angiotensin II levels in hypertensive and normotensive pregnancies // Br J Obstet Gynaecol. - 1991. - Vol. 98, № 2. - P. 155-161.

70. Hariyama Y., Itakura A., Okamura M., Ito M., Murata Y., Nagasaka T., Nakazato H., Mizutani S. Placental aminopeptidase A as a possible barrier of angiotensin II between mother and fetus // Placenta. - 2000. - Vol. 21, № 7. - P . 621-627.

71. Jojovic M., Wolf F., Mangold U. Epidermal growth factor, vascular endothelial growth factor and progesterone promote placental development in rat whole-embryo culture // Anat Embryol (Berl). - 1998. - Vol. 198, № 2. - P. 133-139.

72. de Jong C.L., Dekker G.A., Sibai B.M. The renin-angiotensin-aldosterone system in preeclampsia. A review // Clin Perinatol. - 1991. - Vol.18, № 4. -Р. 683-711.

73. Grechura M, Opala G. Changes in central nervous system during preeclampsia//Wiad Lek. 2005; P. 58(7-8): 433-6.

74. Ivanchenko SA. The biochemical mechanisms of the metabolic disorders in gestosis// Lik Sprava. 1999; P. 19 - 21

75. Iwase A., Nomura S., Mizutani S. Characterization of a secretase activity for placental leucine aminopeptidase // Arch Biochem Biophys. - 2001. - Vol. 393, № 1. - P. 163-169.

76. Iwashita M., Kudo Y., Shinozaki Y., Takeda Y. Gonadotropin-releasing hormone increases serum human chorionic gonadotropin in pregnant women // Endocr J. - 1993. - Vol. 40, № 5. - P. 539-544.

77. Kingdom J.C., McQueen J., Connell J.M., Whittle M.J. Fetal angiotensin II levels and vascular (type I) angiotensin receptors in pregnancies complicated by intrauterine growth retardation // Br J Obstet Gynaecol. - 1993. - Vol. 100, № 5. - P. 476-482.

78. Krege J.H., Katz V.L. A proposed relationship between vasopressinase altered vasopressin and preeclampsia // Med Hypotheses. - 1990. - Vol. 31, № 4. - P. 283-287.

79. Kreze A Jr, Kothaj P, Dodakova M, Rohon S. Primary aldosteronism caused by aldosterone-producing adenoma in pregnancy - complicated by EPH gestosis//Wien Klin Wochenschr. 1999; P. 111(20) : 855-7

80. Lowry O.H., Rosebrought N.J., Farr A.G., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J Biol. Chem. 1951. -Vol. 193, № 1. - P. 256-275.

81. Makatsariia AD, Genievskaia MG. Thrombophilia and fetal loss syndrome //Vestn Ross Akad Med Nauk, 2001; P. 35 - 40

82. Makrigiannakis A., Zoumakis E., Kalantaridou S., Chrousos G., Gravanis A. Uterine and embryonic trophoblast CRH promotes implantation and maintenance of early pregnancy // Ann N Y Acad Sci. - 2003. - Vol. 997. - P. 85-92.

83.

84. Michalski U, Bauer W, Gojowczyk R, Lochle C, Pross E. A rare differential diagnosis a pregnancy gestosis// Dtsch Med Wochenschr. 1999. P. 124(40): 1164-7

85. Reznik S.E., Salafia C.M., Lage J.M., Fricker L.D. Immunohistochemical, localization of carboypeptidases E and D in the human placenta and umbilical cord // Histochem. Cytochem. - 1998. - Vol. 46, № 12. - P. 1359-1368.

86. Salafia C.M. Placental pathology of fetal growth restriction. // Clin.Obstet. Gynecol, 1997; 40: 740-9.

Страницы: 1, 2, 3